ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃等。37℃是試驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的适宜溫度。在樹立ELISA方法作反響動力學研究時，試驗标明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經1～2小時，産(chǎn)品的生成可達高峰。爲加快反響，可進步反響的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜選用更高的溫度。但因所需時刻太長(zhǎng)，在ELISA試劑盒中一般不予選用。

ELISA試劑(jì)盒實踐(jiàn)進程操作技巧：

1）加樣器應筆(bǐ)直參(cān)加标本，防止刮擦包被闆底部，加樣進程中防止液體外濺，血清殘留在反響孔壁上。

 2）加樣器吸頭要清洗幹淨，防止污染，加樣次第要與說明書共同，否則可導(dǎo)緻成果過錯(cuò)，試驗重複性差。

 3）在進行試驗前應對試驗的物理參(cān)數有充沛的瞭(le)解，如環境溫度、反響孵育溫度和孵育時刻、洗刷的次數等，要先檢查水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。

 4）顯色液量不行過多，加樣的工作環境不能處(chù)於(yú)陽光直射的環境下，加顯色體系後要避光反響，顯色液量不能過多，防止顯色過強。

 5）要確(què)保加液量共同，在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量禁絕，造成顯色不一緻，判别過錯(cuò)。