成功的實驗是個循序漸進的過程影響EL ISA實驗結果的因素有很多隻有的掌握瞭實驗的細節才能購做出好的實驗。 您可知您的ELISA試劑盒實驗爲什麽會失敗?下面酶聯生物帶大家瞭解一下。

一、标本的影響

溶血标本及混有紅細胞的血清採(cǎi)用E1 ISA法檢測(cè)易産生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素)在洗滌過程中往往難以洗脫它可使H202釋放出原生态氧 (0)從而催化底物四甲基聯苯胺可溶性的有色物質即顯藍色産生假陽性。所以嚴重溶血标本禁用。

二、标本受細菌污染

因菌體中可能含有内源性辣根過氧化物酶因此 被細菌污染的标本同溶血标本樣 亦可産(chǎn)生非特異性顯色而幹擾測(cè)定結果。

三、标本保存不擋

在冰箱中保存過久的标本在間接法ELISA測定中會導緻本底過深 造成假陽性;爲克服 上述幹擾ELISA試劑盒測定的血清标本宜爲新鮮採(cǎi)集;如不能立即測定5d内測定的血清标本可存放於(yú)4°C,1周後測定的血清标本應低溫凍存 ;凍存後融解的标本 蛋白質局部濃縮分布不均 應充分混合後再測定但混勻時應輕柔不可強烈振蕩。

四、标本凝固不全

在工作中有時爲瞭(le)争取時間快速檢測 常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清使血清中仍殘留部分纖維蛋白原 在EL ISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊易造成假陽性結果 ;因此血波标本採(cǎi)集後必須使其充分凝固後再分離血清。

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以上是酶聯生物帶您瞭解ELISA試劑盒實驗失敗的原因，您知道瞭嗎？