Elisa試劑盒採用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗。計算方法是以标準物的濃度爲橫坐标，OD值爲縱坐标，在半對數坐标紙上繪出标準曲線，根據樣品的OD值由标準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用标準物的濃度與OD值計算出标準曲線的直線回歸方程式，将樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即爲樣品的實際濃度。

Elisa試劑(jì)盒在沒有去離子水或雙蒸水時，可以使用純(chún)淨水配制溶液，切勿使用自來水。

1.樣品稀釋：酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應，如果血清不稀釋，不可避免會産生很強的非特異性反應，出現假陽性。因此，國外檢測血清抗體的試劑盒，均規定将血清稀釋至适當的倍數，以降低非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。樣品稀釋倍數均通過大量試驗確(què)定，以保證試驗的靈敏度和特異性。但是，有些用戶未能嚴格按使用說明書操作，如産品應取10u1樣品進行稀釋，個别用戶取5u1甚至1u1樣品進行稀釋，由於(yú)吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠，因此造成樣品稀釋倍數不準確(què)，檢測結果出現問題。

2.試劑盒平衡：試劑盒中所有試劑和闆條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃)，一般需在室溫放置20~30分鍾以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠，樣品孵育時間相對(duì)縮短，ELISA反應不夠充分。冬季室溫低，可将試劑盒打開盒蓋(gài)置37℃溫箱20分鍾。稀釋前、後的樣品需要充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗的均一性。

3.加樣：盡量操作規範，将液體垂直懸空快速加入到微孔闆中，避免加到孔避上。加完試劑後用手适當(dāng)振蕩(dàng)或在桌面适當(dāng)作圓周運動，使孔内試劑充分混勻，蓋好蓋闆膜。

4.洗闆：洗液盡量不要溢出孔外；加洗液後要靜置10-15s，甩去闆孔中洗液後，一定要用力拍幹(gàn)；及時更換吸水紙，尤其是拍過(guò)酶标記物的吸水紙一定要棄去，否則可能影響試驗結果。

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以上是Elisa試劑盒樣品進行如何正確稀釋你知道嗎？