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上海酶聯淺談如何區分雙抗夾(jiā)心法、間(jiān)接法和競争法
更新時間:2022-10-12   點(diǎn)擊(jī)次數:2978次

近年來,ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點得到瞭廣泛的應用,ELISA試劑盒根據試劑的來源和标本的情況以及檢測的具體條件,又分爲雙抗夾心法、間接法、競争法等幾種類型。


那麽,這幾種類型分别應用於(yú)哪些實驗?這些類型的優缺點(diǎn)又是什麽呢?請繼續往下看!

雙抗體夾(jiā)心法測(cè)抗原:雙抗體夾(jiā)心法是檢測(cè)抗原常用的方法,适用於測定二價或二價以上的大分子抗原,但不适用於測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。


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雙抗原夾心法測抗體:反應模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結合物,以檢測相應的抗體。與間接法測抗體的不同之處爲以酶标抗原代替酶标抗抗體。此法中受檢标本不需稀釋,可直接用於(yú)測定,因此其敏感度相對高於(yú)間接法。乙肝标志物中抗HBs的檢測常採(cǎi)用本法。本法關鍵在於(yú)酶标抗原的制備,應根據抗原結構的不同,尋找合适的标記方法。


間接法:是檢測抗體常用的方法,本法主要用於對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。 

競争法測(cè)抗體:當抗原材料中的幹擾物質不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理爲标本中的抗體和一定量的酶标抗體競争與固相抗原結合。抗HBe的檢測(cè)一般採(cǎi)用此法。 


競争法測(cè)抗原:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測(cè)定,可以採(cǎi)用競争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原競争與固相抗體結合。标本中抗原量含量愈多,結合在固相上的酶标抗原愈少,後的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測(cè)定多用此法。


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