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分享細胞培養的三個小經驗
更新時間:2025-08-27   點(diǎn)擊(jī)次數:440次

上海酶聯生物有限公司總部設在上海,公司專業經營生命科學領域的研究試劑、實驗室消耗品等,我們緻力於(yú)向國内外生命科學研究人員提供産(chǎn)品和技術服務。接下來我司分享細胞培養的三個小經驗:

分享細胞培養的三個小經驗


1. 不要頻繁看細胞。對於(yú)初學者而言,養細胞就像養孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養不好,就越是經常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特别是對原代細胞或是免疫磁珠分選後,密度特别低的細胞。培養基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利於(yú)生長的局部環境。你跑去看細胞,培養瓶這麽一晃,把因子都給晃散瞭(le)。經常可以看到新手一天到晚都在看細胞,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長。

2. 不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養基怎麽越用越發紫的困惑?知道爲什麽嗎?燒瓶口燒的。培養基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶内。塞緊塞子放入冰箱後,空氣變(biàn)冷,壓力驟降,培養基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養基中的碳酸少瞭(le),當然會變(biàn)堿。如果不燒瓶口的話,你會發現培養液變(biàn)堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因爲室溫還是比冰箱内的溫度高)其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發現根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這麽晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國内從來就不燒瓶口。來美國以後發現這裏更,超淨台内根本就不點酒精燈。

3. 不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我師兄在做血管平滑肌原代的時候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞變(biàn)圓後才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要産(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。

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