按試劑(jì)盒說明書的要求準備(bèi)實驗中需用的試劑(jì)。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用於(yú)洗滌的，應爲新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡後使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。

ELISA試劑盒的配制：對於(yú)每種細胞因子應仔細閱讀說明書，注意每批的細節。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節，将凍幹的細胞因子複溶。 一般待測抗原标準曲線的線性範圍的可通過将标準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用标準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定範圍内提高靈敏度。爲瞭(le)優化靈敏度，建議孵育标準品和标本。若使用過氧化物酶作爲顯色系統，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。

可用作ELISA試劑盒測(cè)定的标本十分廣泛，體液（如血清 ）、分泌物（唾液）和排洩物（如尿液、糞便）等均可作标本以測(cè)定其中某種抗體 或抗原成份。ELISA試劑盒有些标本可直接進行測(cè)定（如血清 、尿液），有些則需經預處(chù)理（如糞便和某些分泌物）。這些标本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。

ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國内醫學檢驗一般均用闆式點(diǎn)。    本文将叙述闆式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應用。