冷凍(dòng)原則：冷凍(dòng)細胞之活化原則爲快速解凍(dòng)，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導(dǎo)緻細胞之死亡。 細胞活化後，約需數日，或繼代一至二代。其細胞生長(zhǎng)或特性表現才會恢複(fù)正常(例如産(chǎn)生單(dān)株抗體或是其它蛋白質)。

一、操作步驟：

①操作人員應戴防護(hù)面罩及手套，防止冷凍(dòng)管可能爆裂之傷害。

②自液氮或幹冰容器中取出冷凍(dòng)管，檢查蓋子是否旋緊，由於(yú)熱脹冷縮過程，此時蓋子易松掉。

③将新鮮培養基置於(yú)37 °C 水槽中回溫，回溫後噴以70 % 酒精並(bìng)擦拭之，移入無菌操作台内。

④取出冷凍(dòng)管，立即放入37 °C 水槽中快速解凍(dòng)，輕(qīng)搖冷凍(dòng)管使其在1 分鍾内全部融化，以70%ethanol 擦拭保存管外部，移入無菌操作台内。

⑤取出0.9 ml 解凍(dòng)之細胞懸浮液，緩緩加入有培養基之培養容器内(稀釋比例爲1:10～1:15)，混合均勻，放入CO2 培養箱培養。另取0.1 ml 解凍(dòng)細胞懸浮液作存活測(cè)試。

⑥解凍(dòng)後(hòu)是否立即去除冷凍(dòng)保護劑(例如DMSO 或glycerol)，依細胞種類而異，一般而言，大都不需要立即去除冷凍(dòng)保護劑。惟若要立即去除，則将解凍(dòng)之細胞懸浮液加入含有5-10 ml 培養基之離心管内，離心1,000 rpm, 5 分鍾，移去上清液，加入新鮮培養基，混合均勻，放入CO2 培養箱培養。

⑦若不需立即去除冷凍(dòng)保存劑，則在解凍(dòng)培養後(hòu)隔日更換培養基。

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