在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響，即加标本和加酶結合物後，抗原抗體反響的完結需求有一定的溫度和時刻，這一保溫進程稱爲溫育，有人稱之爲孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當。

1. 爲什麽(me)ELISA反響總是需求一定時(shí)刻的溫育？

ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結合隻在固相表面上發生，以抗體包被的夾心法爲例，加入闆孔中的标本，其間的抗原並(bìng)不是都有平等的和固相抗結合的時機，隻有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸，這是一個逐步平衡的進程，因而需經擴散才能到達反響的結尾。在這以後加入的酶标記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。

2. 溫(wēn)育常選(xuǎn)用的溫(wēn)度有43℃、37℃、室溫(wēn)和4℃等。

37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的适宜溫度，在建立ELISA方法作反響動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經1～2小時，産(chǎn)品的可達高峰。爲加快反響，可進步反響的溫度，有些實驗在43℃進行，但不宜選用更高的溫度。抗原抗體反響4℃更爲，在放射免疫測(cè)定中多使反響在冰箱中過夜，以構成多的沉澱。但因所需時刻太長，在ELISA試劑盒中一般不予選用。

ELISA試劑盒保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均選用水浴，可将ELISA試劑盒闆置於(yú)水浴箱中，ELISA闆底應貼著(zhe)水面，使溫度敏捷平衡。爲防止蒸騰，闆上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋闆孔，此時可讓反響闆漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA試劑盒應放在濕盒内，濕盒要選用傳熱性良好的資料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，後将ELISA闆放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規則的溫度，特别是在氣溫較低的時候更應如此。

無論是水浴仍是濕盒溫育，反響闆均不宜疊放，以確(què)保各闆的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響，操作時的室溫應嚴厲限制在規則的範圍内，規範室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時，ELISA試劑盒隻需平置於(yú)操作台上即可。應留意溫育的溫度和時刻應按規則力求準確(què)。爲確(què)保這一點，一個人操作時，一次不宜多於(yú)兩塊闆一起測定。