在細胞培育實驗室中,血清是常見的試劑之一,常見的血清種屬有人的和動(dòng)物兩種,依據客戶對産(chǎn)種類屬與來源的挑選,價格也是不同的。
關於(yú)實驗新手來說,稍有不慎就會影響到實驗結果,甚至讓花費(fèi)幾千元買來的血清失掉作用。今天我司與您讨論“怎麽奇妙使用血清培育細胞”。
咱們今天要說的血管平滑肌細胞培育選用的是貼塊法,這種辦(bàn)法具有取得平滑肌細胞純度高,量多,操作簡潔的長(zhǎng)處。但用貼塊法易使平滑肌細胞胞質内肌絲喪失,亞細胞器添加。
在這辦(bàn)法中,大家可要注意啦!不同動物血管結構有差異,豬和猴較易操作,但小動物如兔、鼠因其血管小,血管壁薄等特色,使之難以分離。另外安排塊太薄,不易粘附培育基,也使細胞較難成長(zhǎng)。
我司特别提示,實(shí)驗中請(qǐng)注意:
1. 依據(jù)培育細胞的種屬加入适量的不同血清,一般可加入胎牛血清,若小牛血清增殖作用差,應加胎牛血清(FBS),通常濃(nóng)度爲10%~20%。
2. 培育基的挑選:常用的有DMEM,M199培育基。培育兔的平滑肌細(xì)胞用DMEM作用較(jiào)好。
3. 種植安排塊的數目,如75cm2的長頸瓶安排塊不得少於30。