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ELISA試劑盒細節要求
更新時間:2019-10-30   點(diǎn)擊(jī)次數:1745次

實驗者們往往對結果zui爲關注,而因此忽略瞭細節問題,但結果取決於細節!做實驗,上海酶聯生物教您掌握ELISA試劑盒細節(供參考,瞭解更多可在本公司中留言)。
◆根據採用的載體分爲:
1.疏水性聚脂布作爲載體;
2.聚苯乙烯微量闆爲載體;
3.硝酸纖維膜爲載體。
ELISA是将酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來的一種微量分析技術。酶标記抗原或抗體以後,既不影響抗原抗體反應的特異性,也不改變酶本身的活性。因爲ELISA試劑盒價格低廉且準確性搞、反應時間短等優點,所以适合大批量的檢測,一般常常用於食品安全檢測方面。
◆ELISA需要遵循的幾個細節要點:
1、抗原或抗體能吸附於固相載體表面,並保持其免疫學活性;
2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;
3、酶結合物與相應抗原或抗體結合後,可根據加入底物的顔色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顔色反應的深淺是與标本中相應抗原或抗體的量成正比例的,可根據已知濃度的抗原或抗體的顔色反應的深淺繪制标準曲線並依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
◆注意事項:
1、标本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有内源性HRP,也會産生假陽性反應。保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底加深。
2、凍結标本溶解後,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下颠混合,不要在混勻器上強烈震蕩。
3、渾濁或有沉澱的标本應先離心或過濾,澄清後再檢測。
4、反複凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
除瞭以上内容,在ELISA試劑盒細節中,稀釋前、後的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性。

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