抗原抗體具體反應之可逆性
Ag·Ab 的解離程度與K 值有關。高親和力抗體的抗原結合點與抗原的決定簇在空間構型上非常适合,兩者結合牢固,不易解離。解離後的抗原或抗體均能保持原有的結構和活性,因此可用親和層(céng)析法來提純(chún)抗原或抗體。
在抗血清中,特異性的IgG 抗體僅占總IgG 中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體,稱爲親和層析純抗體,應用於(yú)免疫測(cè)定中可得到更好的效果。
抗原抗體具體反應之适比例
在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體複合物(沉澱)的量見圖1-4。曲線的高峰部分是抗原抗體比例*合适的範圍,稱(chēng)爲等價帶(dài)(zone of equivalence )。
在等價帶(dài)前後分别爲抗體過(guò)剩帶(dài)和抗原過(guò)剩帶(dài)。
如果抗原或抗體極度過剩,則無沉澱物形成,在免疫測(cè)定中稱(chēng)爲帶現象(zone phenomenon )。抗體過量稱(chēng)爲前帶(prezone),抗原地過量稱(chēng)爲後帶(postzone)。
在用免疫學方法測(cè)定抗原時,應使反應系統中有足夠的抗體量,否則測(cè)得的量會小於(yú)實際含量,甚至出現假陰性。
抗原抗體具體反應之特異性
抗原抗體的結合實質上隻發生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結合位點之間。由於(yú)兩者在化學結構和空間構型上呈互補(bǔ)關系,所以抗原抗體反應具有高度的特異性。
例如乙肝病毒中的表面抗原( HBsAg )、e 抗原(HBeAg)和核心抗體(HBcAg),随來源於(yú)同一病毒,但僅與其相應的抗體結(jié)合,而不與另外兩種抗體反應。
抗原抗體反應的這種特異性使免疫測(cè)定能在一非常複(fù)雜的蛋白質化合物(例如血清)中測(cè)定某一特定的物質,而不需先分離待檢物。
但是這種特異性也不是的,假使兩種化合物有著(zhe)部分相同的結構,在抗原抗體反應中可出現交叉反應。例如:絨毛膜促性腺激素( hCG)和黃體激素(LH)均由α和β兩個亞單位組成,其結構的不同處(chù)在β亞單位,而兩者的α亞單位是同類的。
用hCG 免疫動(dòng)物所得的抗血清中含有抗α-hCG 和抗β-hCG 兩種抗體,抗α-hCG 抗體将與LH 中的α酶位發生交叉反應。在臨床檢驗中,如用抗hCG 抗血清作爲診斷試劑檢定尿液中hCG,隻能用於(yú)hCG 濃度較高的試驗,否則婦女生理性排洩入尿液中的微量LH 将與之發生交叉反應。
因此在作爲早孕診斷(duàn)(敏感度應達(dá)到50mIu/mlhCG )的實際中必須應用隻對hCG 特異的抗β-hCG,以避免與其它激素的交叉反應的發生。
根據上海酶聯生物對elisa實驗的全程瞭(le)解,elisa實驗中抗原抗體的具體反應爲以上幾個階段可以解讀。歡迎參考閱讀,您也可以把自己的見解發於(yú)我們在線留言框,我們根據實驗採納您寶貴意見。謝謝!