應客戶們對(duì)年前産(chǎn)品預購的要求，今日開始逐漸安排發貨，具體内容公司業務員會及時聯xi。新年的開始中，公司技術專員爲elisa試劑盒新手入門的使用技術報(bào)告做出一番整理，在這裏分享給您，供參(cān)考。

◎ ELISA方法原理

1. 雙抗體(原)夾心法：檢測(cè)抗原(體)的常見方法，應用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分别作爲固相載體和酶标抗體檢測(cè)溶液中的抗原(适用於(yú)二價以上抗原，不能測(cè) 小分子半抗原)。

2. 間接法：檢測(cè)抗體的方法，利用酶标記(jì)的抗抗體(第二抗體)檢測(cè)已與固相抗原結合的抗體。

3. 競争法：檢測(cè)抗原或小分子半抗原、抗體，以測(cè)抗原爲例，使待測(cè)抗原和酶标抗原競争與固相抗體結合，結果如待測(cè)抗原含量越多，與固相抗體結合的酶标抗原就越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關。

◎ elisa試劑盒操作注意

① 使用幹(gàn)淨的塑料容器配置洗滌(dí)液，使用前充分混勻試劑盒裏的各種成份及樣品。

② 洗滌(dí)酶标闆時應充分拍幹(gàn)，不要将吸水紙直接放入酶标反應孔中吸水。

③ 底物A應揮發，避免長(zhǎng)時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長(zhǎng)時間暴露於(yú)光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成後應立即讀取OD值。

◎ elisa試劑盒質控分析

1. 人員培訓内容包括：

①檢(jiǎn)驗項目的基本原理(ELISA試劑(jì)盒原理)；

②熟悉檢測(cè)技巧，瞭(le)解易出差錯的環節及難點；熟悉檢測(cè)試劑性能(包括試劑盒組成，包被片段及其組成)；③熟悉檢測(cè)儀器的原理及性能;掌握數據處理的能力和質量控制知識；

④某些特殊項目的檢測(cè)如抗HIV等需經有關部門組織的專門培訓班，考試合格後持證上崗(gǎng)。

2. 基本瞭解

① 1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術應用於(yú)臨床檢驗發(fā)展爲ELISA試劑盒技術。

② 特點(diǎn)：ELISA試劑(jì)盒在固相表面組裝免疫活性物質形成"免疫吸附劑(jì)"。

③ 酶标記(jì)免疫活性物質，進(jìn)行信号放大；

④ 有二步溫育反應二次洗滌(dí)過(guò)程；

⑤ 靈敏度特異性相對(duì)較(jiào)高。

⑥ 局限性：隻能檢(jiǎn)測(cè)到ng水平

⑦ 精密度差(批内CV15-20%)；

⑧ ELISA檢測(cè)試劑盒線性範(fàn)圍窄(一個數量級)；

⑨ 存在"HD-HOOK"效應(yīng)。