（一）污染清除方法

培養細胞一經污染，多數較難處(chù)理。如果污染細胞價值不大，宜棄之；在尋找原因後*消毒操作室，複(fù)蘇或重新購置細胞，再培養。  

污染細胞價值較大，又難於(yú)重新得到，可採(cǎi)取以下辦法清除。

1. 細(xì)菌和真菌的清除

抗生素對殺滅細菌較有效。聯合用藥比單(dān)獨(dú)用藥效果好。預防用藥比污染後再用藥效果好。  

預防用藥一般用雙抗生素，污染後清除用藥需採(cǎi)用大於(yú)常用量5～10倍的沖洗法，於(yú)加藥後作用24～48小時，再換常規培養液。此法在污染早期有效。

2. 支原體(tǐ)的清除

(1)  用MRA處(chù)理

用MRA（Mycoplasma Removal Agent）處(chù)理細胞，每4天換一次液,連續處(chù)理15天以確(què)保細胞純潔健康，效果好。   

(2)  用清洗純(chún)化法清除支原體(tǐ)污染的方法

細胞營養馴化→細胞群的篩選→細胞清洗→反複(fù)離心洗滌(dí)。

其原理是利用離心力、細胞、微生物質量和懸液的浮力差達(dá)到清除支原體的目的。由於(yú)支原體個體小且除發酵支原體外多爲細胞外寄生,所以通過反複洗滌細胞和低速離心換液使其中潛在的支原體數量降低限.

如結(jié)合敏感抗生素的抑殺作用，可達(dá)到更好的效果。

(3)  藥物輔(fǔ)助加溫處(chù)理

先用藥物處(chù)理後，再将污染的組織培養物放在41℃培養18小時，可殺死支原體，但對(duì)細胞有不良影響。

(4)  使用支原體(tǐ)特異(yì)性血清  

用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染，因特異抗體可抑制支原體生長(zhǎng)，故經抗血清處理後11天即轉爲陰性，並(bìng)且5個月後仍爲陰性。

但此法比較麻煩(fán)，不如用抗生素方便、經濟(jì)。   

（二）污染的預防

預防是防止細胞培養過程中發(fā)生污染的辦(bàn)法。隻有預防工作做在前，才能将發(fā)生污染的可能性降到小程度。  

 一般預防可從(cóng)以下幾方面著(zhe)手：

1、添加抗生素

2、從(cóng)物品、用品消毒滅菌著(zhe)手

細胞培養所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細，並(bìng)在無菌試驗陰性後(hòu)才能使用。操作室及剩餘的無菌器材要定期清潔消毒滅菌。   

3、從操作者做起

(1)  進無菌室前要用肥皂洗手，按規定穿隔離衣。工作開始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。

(2)  操作者動作要輕，必須在火焰周圍無菌區内打開瓶口，並将瓶口轉動燒灼。操作時盡量不要談話，若打噴嚏或咳嗽應轉向背面。

(3)  操作時要常更換吸管，一旦發現吸管口接觸瞭手和其他污染物品應棄去。實驗完畢用消毒水浸泡的紗布擦台面。

4、防止細胞交叉污染

(1)  在進行多種細胞培養操作時，所用器具要嚴格區分。 

(2)  在進行換液或傳(chuán)代操作時，注射器和滴管不要觸(chù)及細胞培養瓶瓶口，以免把細胞帶到培養液中污染其他細胞。   '

(3)  細胞一旦購置或從别處引入，均應及早留種凍存，一旦發生污染可重新複蘇培養。

5、無(wú)菌室的*消毒 

(1)  0.1%新潔爾滅全面*擦洗無菌室；

(2)  甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣休對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。

(3)  細胞培養，首先要避免污染，但在細胞培養過程中，有瞭污染用适當的方法清除，這樣也可以保證細胞培養的成功。