泌尿道緻病性大腸杆菌PCR檢測試劑盒

産品介紹：

産品名稱：泌尿道緻病性大腸杆菌PCR檢測試劑盒

英文名稱(chēng)：Uropathogenic Escherichia coli（UPEC）PCR

組成及試劑配制:

1、 酶标闆(bǎn)：一塊(kuài)（96孔）

2、 标準品（凍幹品）： 2瓶，請臨用前15分鍾内配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好後室溫靜置大約10分鍾，同時反複颠倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度爲200 U/L，然後做系列倍比稀釋（注：不要直接在闆中進行倍比稀釋），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作爲空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标準品：取0.3ml （不要少於(yú)0.3ml ）200 U/L的上述标準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其餘濃度以此類推。

3、 樣(yàng)品稀釋(shì)液：1×20ml。

4、 檢(jiǎn)測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、 檢(jiǎn)測(cè)稀釋液B：1×10ml。

樣本採集、存放及運輸：

1、樣本採(cǎi)集：各類型樣本按照常規(guī)方法採(cǎi)集。

2、泌尿道緻病性大腸杆菌PCR檢測試劑盒存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反複凍融（zui多凍融3次）。

3、運輸：採(cǎi)用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。

特點優勢：

1.特異性：所有産品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確(què)保所用的每一條引物均爲種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達到100%。

2.重現性：該(gāi)系列所有産(chǎn)品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性爲100%。

3.靈敏性：該系列産(chǎn)品可實現對檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當樣品中的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。

4.實用性：檢測(cè)範圍廣，涵蓋瞭(le)對人體危害較爲嚴重的17種呼吸道及腸道緻病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測(cè)，整個檢測(cè)過程爲3-4個小時。

5.優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行瞭(le)大量菌株的序列破譯，從(cóng)理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過瞭(le)20餘種标準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40餘種近緣标準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確(què)保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。

使用方法：

注：所有試劑使用前需*解凍(dòng)，混合均勻，6,000rpm離心數秒後(hòu)使用。

1. 樣本處(chù)理（樣本處(chù)理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可採(cǎi)用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參(cān)照相關說明書。陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑(jì)準備(bèi)（PCR前準備(bèi)區）

取N個(gè)（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分别加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心後分裝20 μl至單(dān)個(gè)PCR反應管)。組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反應管於(yú)6,000rpm離心30s，轉移至樣本處(chù)理區。

2.泌尿道緻病性大腸杆菌PCR檢測試劑盒加樣（樣本處理區）

3.在上述的PCR反應管中分别加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl，蓋(gài)緊管蓋(gài)，於(yú)6,000rpm離心10s，轉移至擴增區。