1、主要懷疑點：洗闆不充分。

 

2、機器洗版：確保機器設置的針頭能吸幹孔中液體，並且加液針頭能加液大於350ul，加液針頭沒有被異物或者結晶鹽堵住。

 

3、手動洗闆，嚴格按照步驟，使用幹淨滅菌的槍頭和加樣槽，使用無氧化劑的吸水紙。加350ul洗液，靜置90秒，在吸水紙上拍幹孔中液體後再加入下一步洗液或者試劑。

 

4、特别注意，在加入TMB前的洗闆步驟極其重要，殘留的HRP酶會直接導緻TMB顯色。

 

5、TMB 已經污染，檢測TMB是否透明無色，如果偏藍就是污染瞭。

 

6、檢查配制洗液的水是否污染，要求使用的水是雙蒸水，三蒸水或無離子水，水中的Fe3+,Cu3+,Co3+等過渡金屬，以及HClO都會氧化TMB。

 

7、酶标闆受潮，長黴，或者試劑過期。

8、環境污染，空氣中有導緻顯色的物質或者粉塵。