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大鼠胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書

點擊次數:1060 發布時間:2021/3/7
提 供 商: 上海酶聯生物科技有限公司 資料大小:
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資料類型: DOC 浏覽次數: 1060
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大鼠胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用。
檢測範圍:96T
10ng/L -240 ng/L
使用目的:
本試劑盒用於測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中胎盤生長因子(PLGF)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定标本中大鼠胎盤生長因子(PLGF)鼠胎盤生長因子(PLGF)抗體包被微孔闆,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胎盤生長因子(PLGF),再與  HRP 标記的胎盤生長因子(PLGF)抗體 ,形成抗體-抗。用純化的大原-酶标抗體複合物,經過*洗滌後加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成終的。顔色的深淺和樣品中的胎盤生長因子(PLGF)呈正相關。用酶标儀在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過标準曲線計算樣品中大鼠胎盤生長因子(PLGF)濃度。
大鼠胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫分析試劑盒組成


标本要
1.标本採集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可将标本放於-20℃保存,但應避免反複凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過(HRP)活性。
操作步驟
1.  标準品的稀釋:本試劑盒提供原倍标準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。


2.  加樣:分别設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶标試劑,其餘各步操作相同)、标準孔、待測樣品孔。在酶标包被闆上标準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然後再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度爲 5倍)。加樣将樣品加於酶标闆孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封闆膜封闆後  37℃溫育30分鍾。
4.配液:将 30倍濃   30倍稀釋後備用
5.洗滌:小心揭掉封闆膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜 30秒後棄去,如此重複 5次,拍幹
6.加酶:每孔加入酶标試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鍾.
10.終止:每孔加終止液    50µl,終止反應(此時藍色立轉)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液後 15分鍾以内進行。
大鼠胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫分析試劑盒操作程序總:


計算
以标準物的濃度爲橫坐标, OD值爲縱坐标,在坐标紙上,根據樣品的OD值由标準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用标準物的濃度與  OD值計算出标準曲線的直線回歸方程式,将樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即爲樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鍾後方可使用,酶标包被闆開封後如未用完,闆條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響。
3.各步加樣均應使用加樣器,並經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在 5分鍾内,如标本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.大鼠胎盤生長因子(PLGF)酶聯免疫分析試劑盒請每次測定的同時做标準曲線,好做複孔。如标本中待測物質含量過高(樣本  OD值大於标準品孔di一孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定,計算時請後乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封闆膜隻限一次性使用,以避免交叉。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批号組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月

 

 
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