ELISA試(shì)劑(jì)盒标本保存,在ELISA試劑盒實驗中是非常重要的,常有ELISA操作員反映在标本保存時出現溶血、凝集不全、受細菌污染等現象發(fā)生,我公司技術員特針對(duì)相關常見問題做出總結,下面我們就來看看今天的内容:搞定ELISA試劑盒方法我有妙招!

一、标本保存不當
在冰箱中保存過(guò)久的标本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導緻本底過深、甚至造成假陽性;标本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現假陰性。爲克服上述幹擾,ELISA測定的血清标本宜爲新鮮採(cǎi)集;如不能立即測定,5天内測定的血清标本可存放於(yú)4℃,1周後測定的血清标本應低溫凍存;凍存後融解的标本,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混合後再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩。
二、标本溶血
由於(yú)各種人爲原因引起的标本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶爲标記的ELISA測(cè)定中,會導緻非特異性顯色,ELISA試劑盒幹擾測(cè)定結果。爲克服上述幹擾作用,标本採(cǎi)集時必須注意避免溶血。
三、标本凝集不全
在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液採(cǎi)集後(hòu)1/2~2h開始凝固,18~24h凝固。臨床檢驗工作中,有時爲瞭(le)争取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;這類情況於(yú)次日複查時因血凝,血清中不再有纖維蛋白原存在,故複查結果變爲陰性。爲避免上述幹擾作用,解決的辦法最好是血液标本採集後必須使其充分凝固後再分離血清,或标本採集時用帶分離膠的採血管或於(yú)採血管中加入适當的促凝劑。
四、标本受細菌污染
因菌體中可能含有内源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的标本同溶血标本一樣,亦可産(chǎn)生非特異性顯色而幹擾測(cè)定結果。