ELISA實驗通用規則
1、要保證移液槍的準確(què)性,誤差不能超過2%。可用水和電(diàn)子天平進行確(què)定。但最好有專業人員進行矯正。
2、要配備(bèi)20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體後(hòu),要更換槍頭。即使是吸取标準品時。
3、液體全部加完後(hòu),可将酶标闆在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體(tǐ)。也可以用酶标儀的晃動(dòng)功能。
4、溫浴時,要用不幹膠或膠帶(dài)紙封好酶标闆,防止水分的蒸發(fā)。
5、洗闆時,每次洗液加入後(hòu),應靜(jìng)置1分鍾,沒有洗闆機時,倒去液體後,要将酶标闆在報(bào)紙或毛紙上用力拍幹(gàn)。
6、洗液不夠(gòu)時,可用蒸餾(liú)水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖(chōng)液,加入0.1%的吐溫20作爲洗液。加入1/1000的疊氮鈉後可長(zhǎng)期保存。

7、要在實驗前1小時将試劑盒從(cóng)冰箱中取出,使各種試劑都恢複(fù)到室溫,以使結果更穩定。
8、實(shí)驗時(shí),要使底物避光保存。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免産(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確(què)。
10、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍(qiāng)去吸,減(jiǎn)少誤差。
11、将液體加到酶标孔中時,避免槍頭和孔内液體接觸(chù),可使槍頭上的液滴和孔壁接觸(chù),液滴會(huì)自然流下去。
ELISA試劑盒實驗中需留心下列的細節:
1. 嚴格按照規定的時刻和溫度進行溫育以保證成果。一切試劑都必須在運用前到達(dá)室溫20-25℃。運用後當(dāng)即冷藏保存試劑。
2. 洗闆不正確(què)能夠導(dǎo)緻不的成果。在加入底物前確(què)保盡量吸幹孔内液體。溫育過程中不要讓微孔枯燥掉。
3. 消除闆底殘(cán)留的液體(tǐ)和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的色彩,現已變(biàn)藍(lán)的底物液不能運用。
5. 防止試劑(jì)和标本的穿插污染以免形成錯(cuò)誤成果。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時防止強(qiáng)光直接照射。
7. 平衡至室溫後(hòu)再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷闆條上。
8. 任何反響試劑不能觸(chù)摸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會損壞試劑盒中反響試劑的生物活性。
9. 不能運用過期産品。
10. 假如可能傳播疾病,一切的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測(cè)設備(bèi)。