Elisa試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到瞭(le)廣泛的應用，然而實驗新手們面對各種各樣、動則上上千種的Elisa試劑盒，内心應該是崩潰的。

Elisa試劑盒的操作

(一)檢驗方法

1.使用前将試劑(jì)盒置室溫30分鍾，恢複(fù)至室溫。

2.取所需用量酶标闆條，設空白對(duì)照1孔、陰性/陽性對(duì)照各2孔，未用的闆條盡(jǐn)快密封，2～8℃保存。

3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對(duì)照孔分别加入陰、陽性對(duì)照100μl；樣品孔每孔加入稀釋後(hòu)的樣品100μl。

4.混勻(yún)，置37℃反應(yīng)30分鍾。

5.扣去孔内液體，每孔加滿洗滌(dí)液，靜置30秒後棄去，重複(fù)洗滌(dí)5次，拍幹。

6.每孔加酶标記(jì)物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鍾。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻(yún)，37℃避光反應(yīng)10分鍾。

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，於(yú)450nm(可用630nm作參(cān)比波長)測定各孔吸光值(A值)。

(二)樣品準備

1.取動物全血按常規方法制備(bèi)血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周内可於(yú)2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋(shì)液将待檢(jiǎn)血清按100倍稀釋(shì)(如2μl血清加入198μl樣(yàng)品稀釋(shì)液中，混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌(dí)液使用前應恢複至室溫使沉澱(diàn)溶解，然後用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

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