做小鼠ELISA試劑盒實驗，有幾種常見的實驗方法，他們分别是競争法、捕獲法、間接法、夾心法、而夾心法又可以分爲雙抗體夾心法和雙抗原夾心法！在今天的文章中，将詳細得跟大家講述雙抗體夾心法！雙抗體夾心法，其基本原理是将一定量的包被抗體以物理吸附的方法固定於聚苯乙烯微孔闆表面，加入無關蛋白載體封閉未結合位點，小鼠ELISA試劑盒然後加入待檢标本，通過加入檢測抗體，酶标記第二抗體後用TMB底物顯色，微孔闆中顔色的深淺與待測物的濃度呈正相關。

該小鼠ELISA試劑盒方法的适用條件是：含有多個抗原表位的大分子物質。因爲這種檢測(cè)方法需要兩種抗體，所以就涉及抗體配對的問題。一般而言，常用的抗體配對方法有一下幾種：包被抗體爲單抗，檢測(cè)抗體爲多抗；包被抗體爲單抗，檢測(cè)抗體爲單抗，但這兩種單抗針對的抗原表位不同；包被抗體爲多抗，檢測(cè)抗體爲多抗，這兩種多抗一般是來源於(yú)不同的宿主。

      這種檢測(cè)方法在應用酶标第二抗體時，應該注意的一個原則是：第二抗體必須隻能針對檢測(cè)抗體，而不能針對包被抗體。鑒於(yú)酶标二抗的局限性，現在一般廠家都引入親和素放大系統，這種系統在提高反應靈敏度的同時，應用起來也更加方便，我們隻需要對檢測(cè)抗體進行标記，小鼠ELISA試劑盒不需要對每一種不同來源的二抗進行酶标記，隻需對親和素做HRP标記就可以省去很多繁瑣的工作。