大家在養細胞的時候，想必大家也一定遇到過細胞狀态差這種情況，但是細胞狀态差，有很多種原因造成。細胞狀态很差，常常出現的現象是：細胞邊緣不清晰、細胞不飽滿、折光性差、背景比較髒、黑點很多、細胞碎片多（細胞凋亡後的細胞碎片）、單個細胞内有空泡（凋亡）且空泡比較多；如果細胞出現老化，也就是細胞比較扁平、增殖減緩、細胞核體積增大、細胞突觸變多，此時觀察到的細胞狀态也是不正常的。所以，除瞭考慮血清和細菌污染的問題，細胞老化也不容忽視~

細胞老化的征兆：

一、細胞周期阻滞

長期的細胞周期阻滞是老化細胞的基本特征，也是體外鑒定細胞老化的指标。爲瞭(le)檢查細胞是否躍出瞭(le)細胞周期，人們通常檢測(cè)增殖指示分子Ki-67的表達豐度；或者通過将與胸腺嘧啶相似的溴脫氧尿mi啶（Bromodeoxyuridine，BrdU）摻入到細胞培養基中，觀察是否有新的DNA合成。細胞老化主要表現爲G1期阻滞，個别情況下也可伴随G2/M期周期阻滞，或直接由G2/M期阻滞誘發形成。

二、細胞形态改變

雖然由於(yú)細胞周期的中斷和DNA複制的停止，老化細胞内的DNA含量與正常細胞類似，但 RNA與蛋白質豐度均比正常細胞要明顯升高。這是因爲，盡管細胞進入老化階段後蛋白質的整體合成速率降低，但是蛋白質的降解體系受到更加明顯的抑制，導緻蛋白質在細胞内持續堆積。但，由於(yú)不同組織來源的細胞，其形态本就各不相同，因此，目前還並(bìng)無客觀的、統一的标準從細胞形态判斷並(bìng)定義老化細胞。換句話說，目前並(bìng)不能直接根據細胞的形态去判斷是否老化細胞。

總結：

研究表明,衰老細(xì)胞的細(xì)胞核、細(xì)胞質和細(xì)胞膜等均有明顯的變(biàn)化：

①細胞内水分減少,體積變(biàn)小,新陳(chén)代謝速度減慢；

②細胞内酶的活性降低；

③細胞内的色素會積累；

④細胞内呼吸速度減(jiǎn)慢,細胞核體積(jī)增大,核膜内折,染色質收縮,顔色加深.線粒體數量減(jiǎn)少,體積(jī)增大；

⑤細胞膜通透性功能改變(biàn),使物質運輸(shū)功能降低.

如何防止細胞老化：

1. 不要等細胞長(zhǎng)得太滿才傳代。細胞太密會導緻細胞狀态下降，産(chǎn)生細胞接觸性抑制。

2. 細胞不要消化過(guò)度。採(cǎi)用醫蛋白酶消化細胞，會造成細胞表面一定程度的細胞損傷。

3. 最重要的是使用優質的血清和培養基：幹細胞對培養基中的内毒素非常敏感。除瞭(le)要留意基礎培養基的内毒素外，也要留意血清的内毒素。如果血清中内毒素≥3EU/ml時，幹細胞很容易老化或死亡，導緻細胞“亞健康"狀态，導緻實驗受到影響。很多使用者，在血清在試用前，就會通過提早審核該批次《檢測報(bào)告》，以決定是否入圍進行試用。

4. 在開始養細胞並傳代時，也要特别注意凍存細胞，以保持細胞有種子庫存在，可以有效避免細胞損傷。