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新版本的樣本處理辦法
更新時間:2023-03-21   點(diǎn)擊(jī)次數:1211次

1、 血漿

用含抗凝劑的採(cǎi)血管或離心管收集血液标本,标本收集後30min内4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。将上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重複凍(dòng)融。避免使用溶血或高血脂的标本。

2、 細胞培養上清

取細胞培養今日上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重複(fù)凍(dòng)融。

3、 細胞裂解液

1. 吸去培養闆内的培養基,用yimei消化細胞,加适量培養基将細胞從(cóng)培養闆上吹下來(lái)。懸浮細胞可省掉。

2. 收集細胞懸液,1000×g離(lí)心10min,棄(qì)去培養基,用預冷的PBS潤洗3次。

3. 參(cān)與适量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前參(cān)與蛋白酶抑制劑)重懸細胞。一般6孔闆一個(gè)孔的細胞量需求150~250μL PBS重懸。

4. 将樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍(dòng),再放室溫凍(dòng)結樣品,重複凍(dòng)融幾回,使細胞充沛裂解。也可将樣品進行超聲破碎,以抵達(dá)裂解的目的。

5. 4℃ 10000×g 離心10min,除去細胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重複(fù)凍(dòng)融。

4、 血清

血清是常用於(yú)ELISA檢測(cè)的一類樣本,處理也比較簡單。

用無熱原、無内毒素的試管或離心管收集血液标本,将試管或離心管室溫放置2小時或4℃過一夜,使血清分出。(将試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的分出。)4℃ 1000×g離心20分鍾,仔細收集上清。建議将血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重複(fù)凍(dòng)融。

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