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介紹ELISA試劑(jì)盒變(biàn)質的原因有哪些
更新時間:2022-12-26   點(diǎn)擊(jī)次數:1346次

ELISA試劑盒的好壞會直接影響ELISA實驗的結果,有的時候ELISA試劑盒會出現變質的情況,那麽,是什麽原因造成ELISA試劑盒變質呢?今天我們就來介紹一下ELISA試劑盒變質的原因。 


1、方法學(xué)的影響(xiǎng)   

ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競争抑制法,其中競争抑制法(HBeAb,HBcAb等採(cǎi)用)因受操作時差所引起的競争等因素的影響,結果重複性較差,質量較難控制。所以說,各種實驗方法在操作過程中可能會導緻ELISA試劑盒變(biàn)質。 


2、試劑因素 

不同批次的ELISA試劑(jì)在制作過(guò)程中很難保證質量一緻,即使是通過批批檢驗的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批号的試劑,並保證保存條件。嚴格執行這一标準可以避免因試劑批号改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的複雜過程,並且能夠保證結果的穩定性。對於效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反複凍融造成試劑的失效。 


3、樣本因素 

标本幹擾因素包括内源性幹擾因素和外源性幹擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、等,後者包括标本溶血、标本被細菌污染、标本貯存時間過長、标本凝固不全、冷凍标本的反複凍融等。 


4、操作因素 

ELISA操作步驟複雜,操作不當将引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。這些步驟在操作過程中,操作不當或者操作時間過長(zhǎng)都有可能造成ELISA試劑盒的變(biàn)質。 


5、常表示結果的常用方法

⑴.定性測定。

⑵.半定量測(cè)定 結(jié)果一般以滴度表示。

⑶.定量測(cè)定 即用已知量的标準品作一系列稀釋後進行ELISA測(cè)定,繪制标準曲線,結果以量或單(dān)位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應闆都必須繪制相應的标準曲線。


ELISA實驗過程複(fù)雜,影響因素較多,而ELISA試劑盒的有效性是ELISA實驗能夠順利進行的前提,因此在實驗過程中要細心操作,安全保存各種試劑,加大複(fù)查力度,確(què)保實驗結果的準確(què)。 


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以上是介紹ELISA試劑盒變質的原因有哪些?

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