如何選擇ELISA試劑盒
一、 原料及粗糙的試劑盒
表現在:準確(què)度不高,重複(fù)性不好。原因可能爲抗體配對效果不是佳,抗體識别抗原的表位容易被破壞,包被抗體或檢測抗體雜蛋白較多,沒有純化或純化效果不好,影響檢測的靈敏度和準確度。
客戶辯别檢測方法:
1.可採用已知濃度的重組細胞因子,稀釋到檢測範圍内作爲樣本加入,看檢測的準確性。
2.對用待測(cè)指标的重組細胞因子做試劑盒說明書上标定的zui小濃度稀釋,可測(cè)出靈敏度,建議5個複孔以上才有意義。一般廠(chǎng)家以20個複孔做出的結果作爲檢測(cè)限。用此實驗可驗證出所購試劑盒的靈敏度是否如說明書所述,也可判斷出所購試劑盒是否有誇大之說。
3.選定一個檢測(cè)範圍内的濃度做多孔重複,可看出平行性好不好。即闆内CV值的大小,此操作時需要小心加樣的準確(què)性。對一些制作較粗糙的試劑盒來說,闆間CV值是較大的。
4.如果有相同指标的進口試劑盒,可用對方的标準品作爲樣本,分别加入各自的試劑盒做檢測(cè),以檢測(cè)試劑盒的真實性,準確(què)性。如其中一種是的進口試劑盒,比較可靠的話,可作爲标準來驗證另一試劑盒的準確(què)程度。

二、檢測樣本類型的判斷
目前ELISA試劑盒檢測(cè)的樣本中,除瞭(le)細胞上清外,還有比較大的一部分是血清和血漿樣本,有些試劑盒對血清和血漿樣本的檢測(cè)效果不好,表現在光值偏低,如RF因子存在的話,光值偏高。
購(gòu)買産(chǎn)品的實驗者如何分辨呢?
對說明書上有說能做血清血漿的試劑盒,如有緩沖液。建議如下:用已知濃度的待測(cè)指标蛋白加入所測(cè)種屬的血清直接加樣和用分析緩沖液按說明書分别加樣,得出結果如差異過大,即可得知分析緩沖液的效果如何,是否確(què)實有作用。
三、試劑盒的選購方法
1.可以對常規品種的指标,因爲需要量較大,所以國内公司會用心做,一般做的不錯,可以用國産(chǎn)的;對於(yú)不常用的指标,因爲用量少,國内公司一般不做研,所以會用國外的。國産(chǎn)和進口盒子一起用,節省經費而且高性價比。
2.可以咨詢該(gāi)公司的技術(shù)人員,看看是否專業。
3.對(duì)其公司要做一個瞭(le)解,對(duì)新的公司還要謹慎考慮。
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以上是上海酶聯生物教你如何選擇ELISA試劑盒,您知道瞭嗎?