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上海酶聯生物ELISA試劑(jì)盒實驗前都要做哪些準備(bèi)?
更新時間:2022-09-16   點(diǎn)擊(jī)次數:1616次

在ELISA實驗中,血清是極爲常見的樣本,那麽在ELISA實驗過程中處理血清樣本時有哪些注意事項呢?今天就跟大家來介紹一下。

   1、要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP爲标記酶的ELISA測(cè)定中,如血清樣本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附於(yú)固相,從而與後面加入的HRP底物反應顯色。

   2、樣本的採(cǎi)集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白産生分解作用;二則一些細菌的内源性酶如大腸杆菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作标記的測(cè)定方法産生非特異性幹擾。

   3、血清樣本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如爲有菌操作,則建議冰凍(dòng)保存。樣本的長(zhǎng)時間保存,應在-70℃以下。

   4、冰凍保存的血清樣本須注意避免因停電等造成的反複凍融。樣本的反複凍融所産(chǎn)生的機械剪切力将對标本中的蛋白等分子産(chǎn)生破壞作用,從(cóng)而引起假陰性結果。此外,凍融樣本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反複颠倒混勻即可。

   5、樣本在保存中如出現細菌污染所緻的混濁或絮狀物時,應離心沉澱(diàn)後取上清檢測(cè)。

   以上就是ELISA實驗中處(chù)理血清樣本的注意事項,處(chù)理好實驗樣本是能順利進(jìn)行實驗的前提,所以大家在一定要多加注意。


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