上海酶聯生物凍存的原代細胞應該如何培養,我司以客戶爲核心,以産品質量求生存,以售後服務求信譽,原代細胞通過不斷改進來提高效率,絕不以犧牲品質作爲代價。
原代細胞是指從機體取出後立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以内的細胞統稱(chēng)爲原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用於(yú)分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等。
一、凍存原代細胞的培養
1.将一管細胞從(cóng)液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。
2.将凍(dòng)存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住並(bìng)旋轉,直到管内物體*融化。
3.将凍(dòng)存管立即從(cóng)水浴中拿出,擦幹,轉入無菌環境。
4.用70%的酒精沖(chōng)洗凍(dòng)存管,然後擦去多餘酒精。
5.打開蓋子,注意手指不要碰到裏面的螺紋(注意,由於(yú)凍(dòng)存管有負壓,開蓋時可能會有少量溢出,這是正常現象)。
6.用多聚賴氨酸包被培養瓶。多數細胞推薦(jiàn)的接種密度爲每平方厘米5000個(gè)細胞。
7.蓋(gài)好培養瓶的蓋(gài)子,輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換(huàn)可打開蓋(gài)子。
8.将培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中。
9.放入培養箱後第6-16小時更換一次培養基,以去除殘(cán)留的二甲基亞楓(fēng)和未貼壁的細胞。
二、原代細(xì)胞的組織塊(kuài)培養法:
1.組織塊接種後的前3天,在觀察和移動的過程中,注意不要引起液體的振蕩。要避免經常翻動和振動,否則組織塊不易附著(zhe)於(yú)瓶壁上或附著(zhe)後也會脫落飄起。
2.加入的培養液不宜過(guò)多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來。
3.當細胞向外遷徙出來後要注意記錄並(bìng)去除漂浮的組織塊和殘(cán)留的細胞,它們産生的有毒物質會影響原代細胞的生長。
4.爲促進組織塊盡快粘貼在培養瓶皿上,可以在種植前先将膠(jiāo)原薄層(céng)塗在培養瓶底壁上。
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