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目前，分子生物學正在並終肯定會讓我們對整個生命科學有一個全面而*的認識，其對免疫測定技術發展的影響也是直接而又有效的，它使我們對以前一些難以檢測的生物活性物質的測定變得輕而易舉，並且大大提高瞭檢測的靈敏度和特異性。

較早用於免疫測定的基因工程抗原是HBcAg和HBsAg，這兩種基因工程抗原的出現，較好地解決瞭(le)抗HBc和HBe的測定問題。因爲要從病毒本身去大量獲取這兩種純抗原較爲困難，並(bìng)且這一點對於難培養的病原微生物來說，如HIV、HCV和梅毒螺旋體等都有些共性。

 一、ELISA 

  HCV目前尚不能體外培養，隻能用基因工程或化學合成方法獲取HCV結構和非結構區的各種抗原片斷，已知HCV基因組有7個功能區組成：核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5（有分爲NS5a和NS5b）區，合成抗原的優點是易於(yú)純(chún)化，特異性好，抗原抗體反應強。

二、代抗HCV-ELISA

由美國ortho公司克隆C1003抗原幾個片斷與人超氧化物歧化酶（SOD）結合。用酵母從(cóng)病毒基因組非結合區得到表達(dá)，表達(dá)爲融合蛋白，亦作爲包被固相載體。

抗原組合：NS4 區二個(gè)基因片斷(duàn)爲NS 5-1-1和C1003

特性：IgG抗C100在發(fā)病後數月後，才檢出，故不宜作早期診斷(duàn)。

約由20%的病人不出現抗體(tǐ)。IgM抗-C100急性期檢(jiǎn)出率隻有64%。

C100的抗原性較(jiào)弱，在HCV複(fù)制中，不能充分暴露宿主的免疫系統。

特異性和靈敏性較差。

三、第二代HCV-ELISA試(shì)劑(jì)盒

 用基因重組的HCV結(jié)構(gòu)蛋白與非結(jié)構(gòu)蛋白抗原包被固相載體。

抗原組(zǔ)合：核心區(qū)（C區(qū)）多肽C22  NS區(qū)多肽C33  C1003和NS 5-1-1

增加C22區和C33區後(hòu)，抗體出現早，有助早期診斷(duàn)，提高陽性率。有利早期診斷(duàn)。

C22是早期易出現(xiàn)病毒血症

四、第四代HCV-ELISA 試劑盒

美國新近推出一種包括HCV基因組7個功能區所有免疫決定基的單一融合蛋白，稱爲多決定基融合抗原，採(cǎi)用表面活性劑處理分界病毒表面複合物，釋放HCV核心抗原      （core）並(bìng)用ELISA法，靈敏度可達500拷貝/ml，已接近核酸擴增檢測水平。

 抗原組合：以Core和NS3作爲主要檢測(cè)片斷(duàn)（比例十分重要）加合成多肽NS4

 特點：

① 直接測Core抗原；

②不易發生變異；

③ 抗IgM 和IgG檢(jiǎn)出率可達(dá)100%；

④ 特異性達(dá)99。8%靈(líng)敏度爲100%。

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