羅布羅布芽生菌PCR檢測試劑盒操作方法:
1、從(cóng)室溫平衡20min後(hòu)的鋁箔袋中取出所需闆條,剩餘闆條用自封袋密封放回4℃。
2、設置規(guī)範(fàn)品孔和樣本孔,規(guī)範(fàn)品孔各加不同濃度的規(guī)範(fàn)品50μL;
3、樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋(shì)液40μL;空白孔不加。
4、除空白孔外,規範(fàn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)符号的檢測(cè)抗體100μL,用封闆膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體,吸水紙上拍幹,每孔加滿洗滌(dí)液,靜置1min,甩去洗滌(dí)液,吸水紙上拍幹,如此重複(fù)洗闆5次(也可用洗闆機洗闆)。
6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、每孔加入停止液50μL,15min内,在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。