當抗原材料中的幹擾物質不易除去,或不易得到足夠的純(chún)化抗原時,可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理爲标本中的抗體和一定量的酶标抗體比賽與固相抗原結合。
标本中抗體量越多,結合在固相上的酶标抗體愈少,因而陽性反應呈色淺於陰性反應。如抗原爲高純度的,可直接包被固相。如抗原中會有幹擾物質,直接包被不易成功,可選用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應的抗體,然後參與抗原,構成固相抗原。
洗刷除去抗原中的雜質,然後(hòu)再加标本和酶标抗體進行比賽結合反應。比賽法測(cè)抗體有多種形式,可将标本和酶标抗體與固相抗原比賽結合,抗HBc 。
ELISA一般選用此法。另一種形式爲将标本與抗原一起參(cān)與到固相抗體中進行比賽結合,洗刷後再參(cān)與酶标抗體,與結合在固相上的抗原反應。抗HBe的檢測(cè)一般選用此法。
小分子抗原或半抗原因缺少可作夾心法的兩個以上的位點,因而不能用雙抗體夾心法進行測定,可以選用比賽法形式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原比賽與固相抗體結合。