Q1.标曲不顯色或顯色很弱，樣本顯色：
溶解标準品以及倍比稀釋時，未渦旋轟動或不可充沛。
标準品溶解、倍比稀釋時均需求渦旋轟動以保證充沛混勻。單純依托移液器重複吹打，效率較低、效果也不必定jia。
Q2.樣本經不同梯度稀釋，ELISA試劑盒核算得到的樣本值差異較大：
有時分咱們不清楚樣本中目的蛋白的濃度怎樣，應該怎樣稀釋，那麽咱們就會做下預實驗，確認稀釋倍數。但是有時分同一樣本做瞭幾個不同梯度稀釋後，核算得到的樣本值之間差異較大。
Q3.本底偏高：
樣本值測不到标曲的本底即Blank孔的OD值一般要求控制在0.1以下(關於高敏ELISA可以恰當放寬要求)。尤其是樣本值特别低的時分，本底過高會掩蓋目的信号，導緻無法測到樣本值。在參加TMB顯色後，需實時觀察标曲顯se情況。通常在S5孔有肉眼可見的弱小藍色，即可中止反應。
Q4.标曲顯色，樣本不顯色：
當樣本中目的蛋白濃度極低或者樣本中攪擾要素較強，就無法檢測到。現在ELISA試劑盒仍然是蛋白檢測活絡度gao的方法，與不同技能結合後，衍生出瞭多種類型的ELISA，提高瞭檢測活絡度。
Q5.不同試劑盒中的組分能否通用：
除非是共用的試劑如洗液、檢測緩沖液，其它組分不主張用其它試劑盒的組分，乃至是同一目标不同批次的試劑盒裏的組分。這些組分(包含标準品、标準品稀釋液、檢測抗體、酶等)都是經過優化的，假如輕率運用其它試劑盒的組分，有或許對效果産生影響。