實驗原理
維生素C是人類營養中zui重要的維生素之一，缺少它時會産生壞血病，因此又稱爲抗壞血酸（ascorbic acid）。它對物質代謝的調節具有重要的作用。近年來，發現它還有增強機體對腫瘤的抵抗力，並具有化學緻癌物的阻斷作用。

維生素C主要存在於(yú)新鮮水果及蔬菜中。水果中以猕猴桃含量zui多，在檸檬、桔子和橙子中含量也非常豐富；蔬菜以辣椒中的含量zui豐富，在番茄、甘藍、蘿蔔、青菜中含量也十分豐富，野生植物以刺梨中的含量zui豐富，每100克中含2800毫克，有“維生素C王”之稱。維生素C爲無色晶體，味酸，溶於(yú)水及乙醇，不耐熱，在堿性溶液中極不穩定，日光照射後易被氧化破壞，有微量銅、鐵等重金屬離子存在時更易氧化分解，幹燥條件下較爲穩定。故維生素C制劑應放在幹燥、低溫和避光處保存；在烹調蔬菜時，不宜燒煮過度並(bìng)應避免接觸堿和銅器。

維生素C具有很強的還原性。它可分爲還原性和脫氫型。還原型抗壞血酸能還原染料 2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身則氧化爲脫氫型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈紅色，還原後變(biàn)爲無色。因此，當用此染料滴定含有維生素C的酸性溶液時，維生素C尚未全部被氧化前，則滴下的染料立即被還原成無色。一旦溶液中的維生素C已全部被氧化時，則滴下的染料立即使溶液變(biàn)成粉紅色。所以，當溶液從(cóng)無色變(biàn)成微紅色時即表示溶液中的維生素C剛剛全部被氧化，此時即爲滴定終點。如無其它雜質幹擾，樣品提取液所還原的标準染料量與樣品中所含還原型抗壞血酸量成正比。

實驗試劑
1. 2%草酸溶液: 草酸2g溶於100mL蒸餾水中。
2. 1%草酸溶液: 草酸1g溶於100mL蒸餾水中。
3.爲潔白色，如變爲則不能用）溶於1%草酸溶液中，並稀釋至100mL，貯於棕色瓶中，冷藏。臨用前配制。
4. 0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶於150mL含有52mg NaHCO3的熱水中，冷卻後加水稀釋至250mL，貯於棕色瓶中冷藏（4℃）約可保存一周。每次臨用時，以标準抗壞血酸溶液标定。

實驗設備
1. 錐形瓶100mL（′2）
2. 吸量管10mL（′1）
3. 容量瓶100mL（′1），250mL（′1）
4. 微量滴定管5mL（′1）
5. 研缽
6. 漏鬥
7. 紗布

實驗材料
自選材料實驗步驟
1. 提取
水洗幹淨整株新鮮蔬菜或整個新鮮水果，用紗布或吸水紙吸幹表面水分。然後稱取 20g，加入20mL 2%草酸，用研缽研磨，四層紗布過濾，濾液備用。紗布可用少量2%草酸洗幾次，合並濾液，濾液總體積定容至50mL。

2. 标準液滴定
準確吸取标準抗壞血酸溶液1mL置100mL錐形瓶中，加9mL 1%草酸，用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡紅色，並保持15s不褪色，即達終點。由所用染料的體積計算出1mL染料相當於多少毫克抗壞血酸（取10mL 1%草酸作空白對照，按以上方法滴定）。

3. 樣品滴定
準確吸取濾液兩份，每份10mL, 分别放入2個錐形瓶内，滴定方法同前。另取10mL 1%草酸作空白對照滴定。

4. 計算
 式中：VA爲滴定樣品所耗用的染料的平均毫升數；
VB爲滴定空白對照所耗用的染料的平均毫升數；
C爲樣品提取液的總毫升數；
D爲滴定時所取的樣品提取液毫升數；
T爲1mL染料能氧化抗壞血酸毫克數（由操作二計算出）；
W爲待測樣品的重量（g）。

注意事項
1. 某些水果、蔬菜（如橘子、西紅柿等）漿狀物泡沫太多，可加數滴丁醇或辛醇。
2. 整個操作過程要迅速，防止還原型抗壞血酸被氧化。滴定過程一般不超過2min。滴定所用的染料不應小於1mL或多於4mL，如果樣品含維生素C太高或太低時，可酌情增減樣液用量或改變提取液稀釋度。
3. 提取的漿狀物如不易過濾，亦可離心，留取上清液進行滴定。