上月中旬，貴州大學王老師在我司訂(dìng)購瞭(le)小鼠免疫球M(IgM)elisa試劑盒。實驗結束後，反映陽性對照、質控在内的所有闆孔顔色均較淡。這是什麽原因造成的?我司技術分析如下：

1. 試劑盒必須在有效期内使用， 超過有效期的産品可能會産生很弱的信号；

2. 試劑盒沒有按規定進行保存，受高溫影響；

3. 試劑、樣品用前未平衡至室溫；

4. 加入試劑的體積和時間有誤， 移液器計量不準，吸嘴内水分太多或不清潔；

5. 洗闆及加樣過程中，酶标受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力；

6. 孵育時間及孵育溫度未達到要求 ，反應闆放入培養箱時注意溫度並及時調整；

7. 洗闆次數過多，或濃縮洗液稀釋倍數不符合要求；洗滌沖擊力太大。浸泡時間太長；

8. 顯色劑加量不足或順序颠倒，或混合後加入；

9. 底物作用時間不夠；

10. 蒸餾水水質有問題；

實驗前檢查試劑的組分及批号，確(què)認試劑未過期。不要将試劑盒長時間置於(yú)常溫下，按使用規定儲藏。

確(què)定所使用的試劑體積正確(què)，加入時間适當(dāng)。校正移液器，移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快，排放應*。

確(què)認盛酶标的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等，確(què)認配制洗液的容器已洗幹淨，確(què)認配制洗液的純(chún)化水達到要求且未受污染。

孵育溫度應控制在37-38℃，孵育時間(jiān)嚴格按照說明書操作。保溫期内不宜多開(kāi)門，以免影響保溫。

嚴格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗闆，減小洗滌(dí)沖(chōng)擊力，按說明書要求置留洗滌(dí)液時間和洗滌(dí)次數。

顯色劑滴瓶垂直向下，持力均勻，滴速不宜過(guò)快，先加顯色劑 A，後加顯色劑B，不可将A、B液混合後加入準確(què)定時間。