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ELISA試劑(jì)盒實驗樣本收集準備(bèi)小結
更新時間:2019-06-05   點(diǎn)擊(jī)次數:1726次

ELISA試劑盒樣本實驗準備:

在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集後當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃備(bèi)用。對於(yú)隔天再檢測的樣本,及時分裝後凍存在-20℃備(bèi)用,有條件的,-70℃凍存備(bèi)用。标本應避免反複凍融。

 

液體類(lèi)标本:  包括血清、血漿(jiāng)、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

 

1.  血清:室溫血液自然凝固10-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉澱(diàn)形成,應再次離心。

 

2.  血漿:應根據标本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作爲抗凝劑,混合10-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉澱(diàn)形成,應再次離心。

 

3.  尿液:用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱(diàn)形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參(cān)照此實行。

 

4.  細胞培養上清:檢(jiǎn)測(cè)分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

 

5.  培養細胞:檢測(cè)細胞内的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞並(bìng)放出細胞内成份。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。

 

6.  組織标本:切割标本後,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備(bèi)用。标本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器将标本勻漿化。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝後一份待檢測(cè),其餘冷凍備(bèi)用。

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